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新人教版选修1:2.1《微生物的实验室培养》课件


专题2 :微生物的培养与应用 专题2 :微生物的培养与应用

病毒 细菌
微生物包括哪五类: 微生物包括哪五类: 放线菌 真菌 原生动物

病毒界 原核生物界 真菌界 原生生物界

特点:结构都相当简单,个体多数十分微小. 特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通 常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到, 常

要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有 的甚至没有细胞结构. 的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿 不能进行光合作用. 素.不能进行光合作用.

细菌:单细胞不分枝的原核微生物。 细菌:单细胞不分枝的原核微生物。 微小而透明, 细菌细胞微小而透明 通常用适当染料染色 细菌细胞微小而透明,通常用适当染料染色 后显微镜观察

细菌细胞由外向里 依次有鞭毛 菌 鞭毛、菌 鞭毛 (纤)毛、荚膜 荚膜、 纤 荚膜 细胞壁、细胞膜 细胞膜、 细胞壁 细胞膜、 细胞质,细胞质 细胞质 细胞质 中又有液泡、 中又有液泡、储 存性颗粒、 存性颗粒、核质 等。
图1-3 细菌的结构

结构特点: 结构特点:坚韧且有弹性 细胞壁有哪些功能? 细胞壁有哪些功能? 固定细胞外形; ①固定细胞外形; ②保护细胞免受外力的损伤; 保护细胞免受外力的损伤; ③阻拦大分子物质进人细胞; 阻拦大分子物质进人细胞; ④使细胞具有致病性及对 噬菌体的敏感性。 噬菌体的敏感性。

伤 寒 杆 菌 细 胞 壁 中 含 毒 素

有些细菌在一定的条件下, 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠 芽孢。 叫做芽孢 芽孢的壁很厚,对干旱、低温、 体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3 境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、 死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水 分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌. 分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.

单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 就会形成一个肉眼可见的, 时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定 形态结构的子细胞群体 叫做菌落。 子细胞群体, 形态结构的子细胞群体,叫做菌落 菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落是鉴定菌种的重要依据。

菌落
细菌的菌落特征 因种而异

放线菌
1、结构: 结构: 单细胞原核 分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝) 分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)

应用: 应用:
链霉素、土霉素、四环素、 链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素

微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是 微生物中发现了几千种抗生素,其中2/3是 2/3 由放线菌产生的

病毒的结构

病毒

SARS病毒、 病毒、 病毒

禽流感病毒

2、病毒的增殖: 、病毒的增殖:

真菌

酵母菌和霉菌

青霉 如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构

生殖

孢子生殖

直立菌丝

营养菌丝

腐生生活

根据细菌所利用的能源和碳源的不同, 根据细菌所利用的能源和碳源的不同, 将细菌分为两大营养类型。 将细菌分为两大营养类型。 自养菌(autotroph) 自养菌(autotroph) 异养菌(heterotroph) 异养菌(heterotroph) 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌

一、课题目标: 课题目标: 了解有关培养基的基础知识, 了解有关培养基的基础知识,进行无 菌技术的操作,进行微生物的培养。 菌技术的操作,进行微生物的培养。 二、课题重点和难点: 课题重点和难点: 无菌技术的操作。 无菌技术的操作。 三、技能目标: 技能目标: 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和 培养基的制备 平板划线法等基本操作技术 熟练、 等基本操作技术, 平板划线法等基本操作技术,熟练、规范 地进行无菌操作,成功地培养微生物。 地进行无菌操作,成功地培养微生物。

(一)培养基 培养基(培养液) 培养基(培养液)是由人工方法配制而成 专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 的,专供微生物生长繁殖使用的营养基质。 1.培养基的类型和用途 1.培养基的类型和用途 按物理状态来分:培养基可分为固体培 (1)按物理状态来分:培养基可分为固体培 养基和液体培养基。 养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌 种分离、鉴定菌落等。 种分离、鉴定菌落等。 (2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别 按功能来分,可分为选择培养基和 选择培养基 培养基。 培养基。 按成分来分,可分为天然培养基 天然培养基和 (3)按成分来分,可分为天然培养基和合成 培养基。 培养基。

一、基础知识: 基础知识:

2.不同的微生物往往需要采用不同 2.不同的微生物往往需要采用不同 参考教材附录内容) 的培养基配方 (参考教材附录内容 参考教材附录内容 3.不管哪种培养基,一般都含有水 3.不管哪种培养基,一般都含有水、 不管哪种培养基 碳源、 氮源、 无机盐、 营养物质, 碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质, 另外还需要满足微生物生长对pH pH、 另外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 营养物质,例如:生长因子 即细菌生长必 而自身不能合成的化合物,如维生素 如维生素、 需,而自身不能合成的化合物 如维生素、 某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气 氧气、 某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二 等的要求。 氧化碳、渗透压等的要求 氧化碳、渗透压等的要求。

加入青霉素的培养基: 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 加入氨基喋呤、 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基 : 分离杂交瘤细胞

合成培养基: 合成培养基:
根据细胞生存所需物质的种类和 数量,用人工方法模拟合成的。 数量,用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、 合成培养基主要成分是氨基酸、 维生素、碳水化合物、 维生素、碳水化合物、无机盐和其它 一些辅助物质。 一些辅助物质。 优点:标准化生产, 优点:标准化生产,组分和含量相 对固定; 对固定;成本低 缺点: 缺少某些成分,不能完全满 缺点: 缺少某些成分, 足体外细胞生长需要。 足体外细胞生长需要。

天然培养基: 天然培养基:
天然培养基有血清、血浆、和组 天然培养基有血清、血浆、 织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。 织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。 优点:营养成分丰富, 优点:营养成分丰富,培养效果好 缺点:来源受限;成分复杂, 缺点:来源受限;成分复杂,影响对某 些实验产物的提取和实验结果的分析; 些实验产物的提取和实验结果的分析; 易发生支原体污染; 易发生支原体污染;

人工合成培养基只能维持细胞生存, 人工合成培养基只能维持细胞生存,要想使细 胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基( 胞生长和繁殖,还需补充一定量的天然培养基(如 血清)。 血清)。

血清中含有: 血清中含有: 多种蛋白质(白蛋白、 ①多种蛋白质(白蛋白、球蛋 铁蛋白等) 白、铁蛋白等) 多种金属离子; ②多种金属离子; 激素; ③激素; 促贴附物质,如纤粘蛋白、 ④促贴附物质,如纤粘蛋白、 冷析球蛋白、胶原等。 冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分

液体培养基: 液体培养基:

表面生长

均匀混浊生长

沉淀生长

固体培养基: 固体培养基:菌落

半固体培养基: 半固体培养基:

无动力

有动力(弥散) 有动力(弥散)

(是否运动) 是否运动)

4.培养基的用途 4.培养基的用途 液体培养基: 液体培养基:增菌 固体培养基:纯化, 固体培养基:纯化,增菌 半固体培养基:动力检测, 半固体培养基:动力检测,保种

(二)无菌技术
1.无菌技术的概念 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中, 无菌操作泛指在培养微生物的操作中, 在培养微生物的操作中 所有防止杂菌污染的方法。 所有防止杂菌污染的方法。无论是随后 将要学到的倒平板 平板划线操作 倒平板、 操作, 将要学到的倒平板、平板划线操作,还 平板稀释涂布法, 是平板稀释涂布法,其操作中的每一步 都需要做到“无菌” 即防止杂菌污染。 都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。 只有熟练、规范地进行无菌操作,才可 只有熟练、规范地进行无菌操作, 能成功地培养微生物。 能成功地培养微生物。

无菌技术包括: 无菌技术包括:
(1)对实验操作空间、操作者的衣着 对实验操作空间、 空间 和手进行 和手进行 清洁和消毒 ; 培养器皿、 (2)将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ; 为避免周围微生物污染, (3)为避免周围微生物污染,实验操 旁进行; 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行; (4)避免已灭菌处理的材料用具与 周 相接触。 围物品 相接触。

2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 (1)消毒定义: 消毒定义: 使用较为温和的物理或化学方法, 使用较为温和的物理或化学方法, 仅杀死物体表面或内部的部分微生物的 过程。 过程。不包括芽孢和孢子 (2)灭菌的定义: )灭菌的定义:
使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生 使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生 所有 包括所有细菌的繁殖体、芽孢、 物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及 病毒,而达到完全无菌的过程。 完全无菌的过程 病毒,而达到完全无菌的过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中 最普通也是最重要的技术。 最普通也是最重要的技术。

比较消毒和灭菌(填表) 比较消毒和灭菌(填表)

比较项
理化因素的 作用强度 消灭微生物 的数量 芽孢和孢子 能否被消灭

消毒
较为温和 部分生活状 态的微生物 不能

灭菌
强烈 全部微生物 能

3.常用的消毒与灭菌的方法 3.常用的消毒与灭菌的方法 (1)消毒的方法: 消毒的方法: 消毒的方法
100℃煮沸 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 煮沸消毒法 100℃煮沸5 巴氏消毒法:70℃下煮 下煮30min 2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min 下煮15min 或 80 ℃ 下煮15min 化学药剂消毒法: 75%酒精 酒精、 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒; 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……

(2)灭菌的方法: 灭菌的方法: 灭菌的方法
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌: 干热灭菌: 60℃下加 160-170 ℃下加 2h。 热1-2h。 3、高压蒸气灭菌: 高压蒸气灭菌: 100kPa、 100kPa、121 ℃ 下维持15 15下维持15-30min.

最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌, 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以 高压蒸汽灭菌 杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休 杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休 眠体, 眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被 破坏。 破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌 高温干热灭菌。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了 防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染, 防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻 璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口, 璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花 也可采用各种金属、塑料及硅胶帽, 塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只 可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过 可让空气通过, 。 平皿是由正反两平面板互扣而成, 是由正反两平面板互扣而成 而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器 具是专为防止空气中微生物的污染而设计的 防止空气中微生物的污染而设计的。 具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。

3.微生物实验室培养的基本操作程序 3.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存

1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 无菌技术还能有效避免操作者自 答:无菌技术还能有效避免操作者自 身被微生物感染。 身被微生物感染。 2.请你判断以下材料或用具是否需要消 2.请你判断以下材料或用具是否需要消 毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。 (1) 培养细菌用的培养基与培养皿 玻棒、试管、 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手 答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。 :(1)、(2 需要灭菌;(3 ;(

三、实验操作
1.制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 制备牛肉膏蛋白胨培养基

操作步骤
水浴锅) 1.计算 2.称量 3.溶化 (水浴锅) 4.灭菌 .灭菌: 培养基用玻棒转移至三角锥瓶中 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉 培养基用玻棒转移至三角锥瓶中, 花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅, 花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力 为100kPa、温度为 、温度为121℃,灭菌 ~30min。将培养 ℃ 灭菌15~ 。 用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内, 皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170 ~ 下灭菌2h。 ℃下灭菌 。 5.倒平板 .倒平板: 待培养基冷却到50 左右时, 待培养基冷却到 ℃左右时,在酒精灯附近倒平 。(倒平板操作见课本 倒平板操作见课本) 后观察平板 后观察平板, 板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污 染才可用来接种. 染才可用来接种

倒平板技术

1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时 左右时, 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时, 培养基灭菌后 才能用来倒平板。 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度? 温度?

答:可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 就可以进行倒平板了。 时,就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰

答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生 通过灼烧灭菌, 物污染培养基。 物污染培养基。

3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 平板冷凝后
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠, 后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置, 后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置, 既可以使培养基表面的水分更好地挥发, 既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅 4.在倒平板的过程中, 在倒平板的过程中 在皿盖与皿底之间的部位, 在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来 培养微生物吗?为什么? 培养微生物吗?为什么? 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之 间的培养基上滋生, 间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板 培养微生物。 培养微生物。

2、纯化大肠杆菌 微生物的接种技术 接种方法有:平板划线法和稀释涂布平板法 接种方法有:平板划线法和

平板划线法:通过接种环在 平板划线法:通过接种环在琼脂固体 接种环 培养基表面连续画线的操作 表面连续画线的操作, 培养基表面连续画线的操作,将聚集的 菌种逐步稀释分散到培养基的表面 逐步稀释分散到培养基的表面. 菌种逐步稀释分散到培养基的表面. 数次画线后 可以分离到由一个细 在数次画线后,可以分离到由一个细 胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体, 繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体, 子细胞群体 这就是菌落. 这就是菌落.

1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环?在划线操作结束时, 都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需 要灼烧接种环吗?为什么? 要灼烧接种环吗?为什么? 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接 答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接 种环上可能存在的微生物污染培养物; 种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后 上次划线结束后, 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种 环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的 环上残留的菌种,使下一次划线时, 菌种直接来源于上次划线的末端, 菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线 次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少, 次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少, 以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环, 以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时 杀死接种环上残留的菌种, 杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和 感染操作者。 感染操作者。

2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却 2.在灼烧接种环之后, 在灼烧接种环之后 后再进行划线? 后再进行划线? 以免接种环温度太高,杀死菌种。 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时 在作第二次以及其后的划线操作时, 3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什 么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起 划线后, 始处要少,每次从上一次划线的末端开始, 始处要少,每次从上一次划线的末端开始, 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少, 减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌 落。

涂布平板的所有操作都应在火焰附近 进行。 进行。结合平板划线与系列稀释的无菌 操作要求,想一想, 操作要求,想一想,第2步应如何进行无 菌操作? 菌操作? 应从操作的各个细节保证“无菌”。 应从操作的各个细节保证“无菌” 例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、 例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、 吸管头不要接触任何其他物体、 吸管头不要接触任何其他物体、吸管要 在酒精灯火焰周围等等。 在酒精灯火焰周围等等。

微生物的恒温培养

微生物的恒温培养

微生物的恒温培养

菌种的保存

1、临时保藏: 临时保藏: 接种到固体斜面培 养基, 养基,菌落长成后 置于4℃冰箱保存。 4℃冰箱保存 置于4℃冰箱保存。 2、长期保存: 长期保存: 甘油冷冻管藏法

四、课题成果评价
(一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 d后无菌落 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落 生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一 致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合 并符合大肠杆菌菌落的特点, 要求的;如果培养基上出现了其他菌落, 要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程 无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不 同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他 及时观察记录的同学会发现这一点, 一些细微的变化。 一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科 学态度与习惯。 学态度与习惯。

本课题知识小结: 本课题知识小结:

【典例解析】 典例解析】 例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的是 关微生物营养物质的叙述中, A.是碳源的物质不可能同时是氮源 A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 D.无机氮源也能提供能量 D

解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别, 解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要 针对微生物的具体情况分析。对于A 选项, 针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是 不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳; 不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可 同时是氮源, NH4HCO3;有的碳源同时是能源, 同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡 萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C 萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C 选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。 选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化 可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3, 碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养 型微生物的碳源和无机盐; NaCl则只能提供无机盐 则只能提供无机盐。 型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对 选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的, NH3可 于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可 为硝化细菌提供能量和氮源。 为硝化细菌提供能量和氮源。

例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 下面对发酵工程中灭菌的理解不正确 灭菌的理解不正确的是 A.防止杂菌污染 A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 B.消灭杂菌 B C.培养基和发酵设备都必须灭菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前 D.灭菌必须在接种前
解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。 解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。 说的是灭菌的目的, A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单 一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物( 一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂 ),所以是正确的 所以是正确的; 是错误的, 菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的 是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌, 是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌, 而是消灭全部微生物 消灭全部微生物。 是正确的, 而是消灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关 的所有设备和物质都要灭菌; 的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是 灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前, 灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种 后再灭菌就会把所接菌种也杀死。 后再灭菌就会把所接菌种也杀死。

例3.右表是某微生物 培养基成分, 培养基成分,请据此回 答: (1)右表培养基可培 养的微生物类型 是 自养型微生物 。 (2)若不慎将过量 NaCl加入培养基中 加入培养基中。 NaCl加入培养基中。 如不想浪费此培养基, 如不想浪费此培养基, 含碳有机物 可再加入 .用 来培养 金黄色葡萄球菌

编号 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦

成分 粉状硫 (NH4) 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H 2O

含量 10g 0.4g 4.0g 9.25g 0.5g 0.5g 100ml

加入( (3)若除去成分②(NH4)2SO4,加入(CH2O), 若除去成分② 该培养基可用于培养 固氮微生物 。 3 类。 (4)表中营养成分共有 不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前, (5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前, 调整pH 要进行的是 调整pH 。 (6)右表中各成分重量确定的原则 依微生物的生长需要确定 是 。 若右表培养基用于菌种鉴定, (7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分 琼脂(或凝固剂) 琼脂(或凝固剂) 是 。


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