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广东省茂名市2013届高三生物一轮单元综合检测 生物技术实践(1) 新人教版选修1


选修 1 生物技术实践(1)
一、选择题(每小题 5 分,共 40 分) 1.(2010· 安徽省合肥二模)用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ( ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种 )。

③都需要在火焰旁进

行接种 ④都可以用来计数活菌 A.①② B.③④ C.①③ D.②④

解析

平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故①正确;平板划线法 采用接种针进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故②错误;纯化 时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故 ③正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故④错误。 答案 C 2.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( A.植物组织培养常用的是固体培养基 B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 C.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 D.在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 解析 在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。 答案 D 3.(2012· 北京黄冈冲刺卷)下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌 处理 C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源 解析 天然培养基是成分不明确的培养基,并不是不需加工配制的培养基;实验 者的双手需进行消毒处理; 分离分解尿素的细菌时,尿素是唯一氮源而不是唯一 的碳源。 答案 C )。 )。

1

4.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是(

)。

A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B.消毒和灭菌实质上是完全相同的 C.接种环用灼烧法灭菌 D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法 解析 消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对

人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子),灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体 内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。 答案 B 5.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D.接种了的选择培养基 解析 将菌液稀释相同的倍数, 在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 多于选择培养基上的数目,因此,用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵 循的原则之一是单一变量,所以与选择培养基一样接种、培养。 答案 C 6.现有两种固体培养基,已知其配制时所加的成分和含量如下表,用这两种培 养基分别去分离土壤中的两种微生物,你认为它们适于分离( 成分 甲培养 基 乙培养 基 0.02% 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% 0.02 % 0.02% 0.02% 0.01% 0.5% 0.5% 2% KH2PO4 MgSO4· 7H2O NaCl CaSO4· 2H2O CaCO3 )。 葡萄 糖 纯淀 粉 )。





A.甲培养基适于分离自养型自生固氮菌;乙培养基适于分离异养型自生固氮菌 B.甲培养基适于分离异养型自生固氮菌;乙培养基适于分离自养型自生固氮菌 C.甲培养基适于分离酵母菌;乙培养基适于分离真菌 D.甲培养基适于分离自养型共生细菌;乙培养基适于分离异养型共生固氮菌
2

解析 固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌, 甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉 是有机物, 由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌;乙培养基中不含有 机碳源,所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。 答案 B 7.(2012· 广东模拟经典卷)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是 ( A.利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数 B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落 C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌 D.用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加 解析 稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数; 接种时要连续划 线,这样可以获得单个菌落;大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖,亚硝酸盐 含量增加,一般腌制 10 天后亚硝酸盐含量下降。 答案 D 8. 三个培养皿中分别加入 10 mL 不同的培养基, 然后接种相同的大肠杆菌样液。 培养 36 h 后,计算菌落数,结果如下表。下列选项正确的是( 培养皿 Ⅰ Ⅱ Ⅲ A.该实验采用的是液体培养基 B.该实验采用平板划线法接种 C.Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子 D.Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖 解析 该培养基加入了琼脂,故为固体培养基,对微生物进行计数,宜采用稀释 涂布平板法(而不是平板划线法)接种;稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养 基上所形成的单个菌落, 即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方 法,一个菌落代表一个单细胞;Ⅰ与Ⅲ对照,说明大肠杆菌生长需要葡萄糖,但 不能证明是否需要生长因子;Ⅱ和Ⅲ对照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌
3

)。

)。

培养基成分 琼脂、葡萄糖 琼脂、葡萄糖、生长因 子 琼脂、生长因子

菌落数 35 250 0

的生长需要碳源如葡萄糖。 答案 D 二、非选择题(共 60 分) 9.(12 分)从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养 →纯种分离→性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集 菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从__________环境 采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其群落中 的数量大大增加, 从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物 的富集培养应选择__________的培养基,并在__________条件下培养。 (3)下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解, 请分析接种的具体方法。

获 得 图 A 效 果 的 接 种 方 法 是 __________ , 获 得 图 B 效 果 的 接 种 方 法 是 __________。 (4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行__________,接种前要进行 __________, 在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在__________条件下进 行。 解析 噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉, 应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养。图 A 菌落分布较均 匀,接种方法是稀释涂布平板法,图 B 菌落集中呈线状,接种方法是平板划线 法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整 pH,接种前要进行高 压蒸汽灭菌,在实验中要注意在无菌条件下进行。 答案 (1)海滩等高盐 (3)稀释涂布平板法 (2)以淀粉为唯一碳源 平板划线法 (4)pH 调整 高温 高压蒸汽灭菌 无菌

10.(12 分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答: 试剂 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水

4

用量

5g

10 g

5g

20 g

1 000 mL

(1)培养基的类型有很多,但培养基中一般都含有水、碳源、__________和无机 盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是__________。培养基配制完成以后, 一般还要调节 pH,并对培养基进行__________处理。该培养基从物理性质上分 类属于__________。 (2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和__________。 (3)假设培养结束后,发现培养基上菌落连成一片,可能的原因是什么?(列举两 项) 解析 培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。配制培养基时加入了琼脂, 因此该培养基属于固体培养基。培养基配制完成后要调 pH 和灭菌。牛肉膏、蛋 白胨中含碳元素, 可作为有机碳源。分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂 布平板法。 平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌,以杀死上次划线时 接种环上残留的菌种; 采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高,否则会使微生物 不能分散成单个细胞。 答案 (1)氮源 牛肉膏和蛋白胨 灭菌 固体培养基 (2)平板划线法 稀释涂

布平板法

(3)稀释倍数不够,菌液的浓度太高;划线时,划完第一次没有灭菌

即接着划第二次;培养过程中灭菌不严格,受到了其他微生物的污染。(任选两 个) 11.(12 分)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中 不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序 选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂 的培养基不透明)。

(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行__________处理。 (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看, 上述培养皿中培养基的特点是____________________。 (3)在划线培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主 要原因是__________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
5

(4)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是__________, 有透明带菌落利用的氮源主要是__________,据此可筛选出目的菌。 (5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株 A 和 B,然后对突变株 A 和 B 进行实验,结果如下表所示: 接种的菌种 A B A+B 一般培养基 不生长 不生长 能生长 实验处理及结果 添加营养物质甲,能生长 添加营养物质乙,能生长 不添加营养物质甲、乙就能生 长

突变株 A 不能在一般培养基上生长的原因是______________________。 突变株 A 和 B 混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是 _______________________________________________________________ _______________________________________________________________。 解析 (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。 (2)从物理性质方面来看,题图培养皿中培养基属于固体培养基;从用途方面来 看,该培养皿中培养基属于选择培养基。该除草剂为含氮有机化合物,降解该除 草剂的细菌可以以除草剂为氮源。故该培养基中除加入除草剂外,不再含有其他 氮源,以选择出能降解该除草剂的细菌。(3)在以该除草剂为唯一氮源的培养基 上,不能降解该除草剂的细菌(除具有固氮能力的细菌外)是不能生长的。(4)含一 定量该除草剂的培养基不透明, 形成透明带是由于该除草剂被某些细菌降解。 (5) 突变株 A 的生长依赖于营养物质甲,突变株 B 的生长依赖于营养物质乙。不添 加营养物质甲和乙,二者混合培养时都能生长,最可能的原因是突变株 A 为突 变株 B 提供了营养物质乙,突变株 B 为突变株 A 提供了营养物质甲。 答案 (1)稀释 (2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂 (4)氮气 该除草剂 (5)突变株 A 缺乏

(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源 合成营养物质甲所需要的酶

突变株 A 生长需要营养物质甲,突变株 B 可以提

供;突变株 B 生长需要营养物质乙,突变株 A 可以提供 12.(12 分)(2011· 北京崇文一模)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。 (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于 ________;它的同化作用类型是 ________。
6

(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。 成 分 含 量 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 显色剂 琼脂 10.0 g 5.0 g 5.0 g 2.0 g 0.2 g 12.0 g

将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到 1 000 mL,根据用途划分该培养基属于 ________培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是________。 (3)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和________。为防止杂菌污 染需要对培养基和培养皿进行________________。 (4)现有一升水样,用无菌吸管吸取 1 mL 水样至盛有 9 mL 无菌水的试管中,依 次稀释 103 稀释度。 各取 0.1 mL 已稀释 103 倍的水样分别接种到三个培养基上培 养,记录的菌落数分别为 55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为________。 (5)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌 相同的是________。 A.制作果酒 C.制作泡菜 B.由果酒制作果醋 D.制作腐乳

(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。与微生物 培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入________。 解析 (1)大肠杆菌不能制造有机物,必须以现成的有机物来合成组成自身的物

质,属于异养型生物,在生态系统中主要分解有机物,属于分解者。 (2)根据表中培养基的组成可看出,该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖(蛋白胨),由 于在培养基中添加了显色剂,可判断此培养基为鉴别培养基。 (3)培养大肠杆菌等微生物时,常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌。 (4)根据公式计算:每升原水样中大肠杆菌数=(55+56+57)÷ 0.1×103×103= 3÷ 5.6×108。 (5)制作果酒用到的微生物是酵母菌,是真核生物;制作果醋和制作泡菜分别用
7

的微生物是醋酸菌和乳酸菌, 二者都是原核生物; 制作腐乳用到的微生物是霉菌, 属于真核生物;而大肠杆菌属于原核生物。 (6)植物组织培养与微生物培养明显不同的就是,组织培养的培养基中还需要加 入植物激素,主要是生长素和细胞分裂素,作用是诱导根、芽的分化。 答案 (1)分解者 异养型 (5)B、C (2)鉴别 乳糖、蔗糖(蛋白胨) (3)稀释涂布平板法

灭菌 (4)5.6×108

(6)植物激素(或生长素和细胞分裂素) 13.(12 分)植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源,以纤维素 类物质生成燃料乙醇的研究越来越受重视。纤维素酶糖化法是目前常用的方法, 其操作过程如图所示:

(1)该方法中,微生物 X 与微生物 Y 不同,微生物 Y 是__________,若从土壤中 获得微生物 X,请写出分离的流程图。为了鉴别微生物 X,培养基的成分为 CMCNa、酵母膏、KH2PO4、琼脂、土豆汁等;在该培养基中,CMC- 的作用 Na 是__________。 (2)若经选择,微生物 X 为木霉,则其内分解纤维素的酶至少包括__________三 种组分,这三种酶协同作用,将纤维素分解为葡萄糖。 (3)在操作过程中,过程③需________以保证乙醇的产生。 (4) 操 作 发 现 , 糖 液 浓 度 过 高 时 , 葡 萄 糖 的 产 生 会 受 到 抑 制 , 其 原 因 是 _____________________________________________________________ ___________________________________________________________________。 解析 微生物 Y 能发酵糖液产生乙醇,故微生物 Y 是酵母菌。鉴别纤维素分解 菌的培养基中,CMC- 能被 CX 酶和 C1 酶分解为纤维二糖,可使被刚果红染色 Na 的培养基的红色褪去,便于鉴别,也为微生物的生长提供碳源。纤维素酶是一种 复合酶,至少包括 C1 酶、CX 酶、葡萄糖苷酶三种组分。酵母菌发酵产生乙醇是 无氧呼吸的过程,在操作过程中应密闭发酵。随着产物(葡萄糖)的增多,反应将 会受到抑制,其机理为酶的活性受到反馈抑制。
8

答案

(1)酵母菌

土壤取样→选择培养→梯度稀释→将菌液涂布到特定的选择

培养基上→挑选产生透明圈的菌落。提供碳源(或便于鉴别) (2)C1 酶、CX 酶、 葡萄糖苷酶 (3)密闭发酵 教学心得 (4)产物(葡萄糖)过多,反馈抑制了分解秸秆的酶的活性

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