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抗原、抗体的制备_图文

抗原、抗体的制备

一、概述
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1、抗原的定义 2、抗体的定义
3、抗原抗体的制备对免疫学技术的意义: 抗原的制备是抗体制备的条件,抗体的 制备是免疫学技术的基础。

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二、抗原的制备
1、颗粒性抗原的制备: (1)细胞抗原:SRBC的制备 颈静脉取血 NS洗涤 配置成要求浓度
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(2)细菌抗原:O抗原、H抗原 确定的菌种 培养18-24h成菌苔 O抗原:100℃2-3小时; H抗原:0.3-0.5%甲醛处理

处理:

(3)组织细胞抗原 取组织块 剪碎 胰酶消化 吹吸使成为 单个细胞 计数,配置成一定浓度

2、可溶性抗原的制备: (1)从组织细胞中提取抗原 方法:研磨法、冻融法、超声波破碎法、 酶处理法、表面活性剂处理法等。 (2)蛋白质抗原的纯化 方法:超速离心分离法、选择性沉淀法、 柱层析法等。

(3)免疫球蛋白片段的制备 胃蛋白酶、木瓜水解酶
(4)半抗原的制备 半抗原与载体结合

三、多克隆抗体的制备
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1、动物的准备 选择动物的原则

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2、佐剂的应用 (1)佐剂的定义 (2)佐剂的特点 (3)佐剂的分类

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3、免疫方法 (1)免疫原的剂量 (2)接种途径 (3)免疫间隔时间
4、采血

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5、血清分离与保存

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6、免疫血清的纯化、鉴定 (1)免疫球蛋白的分离、纯化 (2)杂蛋白的去除:吸附法、亲和层析法


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