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高二生物人教版选修一教学案:专题2 课题1 微生物的实验室培养


一、培养基(阅读教材P14~15) 1.概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。 2.种类 按照培养基的物理状态划分为液体培养基和固体培养基。 3.营养要素 各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对 pH、特 殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术(阅读教材P15~16) 1.获得纯净培养物:关键是防止外来杂菌的入侵。 2.无菌操作主要包括以下四个方面 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染, 实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 3.消毒和灭菌 (1)消毒 ①概念:使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽 孢和孢子)。 ②常用的方法有煮沸消毒法和化学药剂消毒法。 (2)灭菌 ①概念:使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。 ②常见的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 三、大肠杆菌的纯化培养(阅读教材P16~20) 1.制备固体培养基 1 2.纯化大肠杆菌 (1)微生物接种最常用的方法 ①平板划线法: 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作, 将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基的表面。 ②稀释涂布平板法: 将菌液进行一系列的梯度稀释, 然后将不同稀释度的菌液分别涂布 到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 (2)微生物培养分析 ①如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致,说明接种操 作符合要求。 ②若培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中被杂菌污染。 ③未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若长出菌落, 说明灭菌不彻底, 实 验失败。 四、菌种保存(阅读教材P20) 临时保藏法 适用对象 培养基类型 温度 方法 缺点 频繁使用的菌种 固体斜面培养基 4_℃ 菌落长成后于冰箱中保存,每 3~6 个月将菌种从旧的培养基上转移到新 鲜的培养基上 菌种易被污染或产生变异 甘油管藏法 长期保存的菌种 液体培养基 -20_℃ 将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油 混合均匀后于冷冻箱内保存 / 2 [共研探究] 1.下面是察氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分,根据下表,回答下列问题: 蔗糖 20 g NaNO3 3g K2HPO4 1g KCl 1g MgSO4· 7H2O 0.5 g FeSO4 0.01 g 琼脂 20 g 水 定容至 1 000 mL (1)该培养基根据物理性质划分应是固体培养基,原因是该培养基中加入了凝固剂琼脂。 (2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的 4 类营养物质(成分),分别是碳源、氮源、 无机盐和水。有时候还需要加入特殊的营养物质(生长因子)。 (3)①蔗糖提供碳源,除此之外,提供碳源的主要有:a.无机化合物 CO2、Na2CO3 等; b.有机化合物糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。 ②NaNO3 提供氮源和无机盐。 (4)碳源、氮源、生长因子在微生物体内的作用 营养要素 碳源 氮源 生长因子 作用 构成生物体细胞的物质和一些代谢产物, 有些是异养微生物的能源物质 合成蛋白质、核酸及含氮代谢废物 酶和核酸的组成成分 【总结提升】 某些微生物的代谢及特点 (1)硝化细菌:自养,需 NH3 或亚硝酸盐做氮源。 (2)圆褐固氮菌:异养,培养基中不需加氮源。 (3)金黄色葡萄球菌:异养,培养基

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