【精选】人教版高中生物选修1专题5 课题1《DNA的粗提取与鉴定》word导学案-生物知识点总结

专题 5 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定 一、基础知识 （一）提取 DNA 的方法 提取生物大分子的基本思路是选用一定的 或 方法分离具有不同物理或化学性质的生物 大分子。对于 DNA 的粗提取而言，就是要利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在 和 性质方面 的差异，提取 ，去除其他成分。 （1）DNA 的溶解性： （1）DNA 的溶解性： ? DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 ? 此外，DNA 不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于 酒精。利用这一原理，可以将 DNA 与蛋 白质进一步的分离。 （2）DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性： o 蛋白酶能水解 ，但是对 DNA 影响。大多数蛋白质不能忍受 60—80 C 的高温，而 DNA 在 ℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但 对 DNA 影响。 （二）DNA 的鉴定 在 条件下，DNA 遇 会被染成 色，因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的 试剂。 二、实验设计 （一）实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑，但是使用 的生物组织，成功的可能性更 大。 （二）破碎细胞，获取含 DNA 的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用 玻璃棒 ，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用 溶解细胞膜。 例如，提取洋葱的 DNA 时，在切碎的洋葱中加入一定的 和 ，进行充分的搅拌和研 磨，过滤后收集研磨液。 （三）去除滤液中的杂质 方案一 利用 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中 的不同，通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂 质。 方案二 直接在滤液中加入嫩肉粉，反应 10～15min，嫩肉粉中的 能够分解蛋白质。 方案三 将滤液放在 ℃的恒温水浴箱保温 10～15min，注意 范围 。 （四）DNA 的 析出与鉴定 1、将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积 、 的酒精溶液（体积分数为 ），静置 min，溶液中会出现 ，这就是粗提取的 DNA。用玻璃棒 搅拌，卷起丝状物， 并用滤纸吸取上面的水分。 2、取两支 20ml 的试管，各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml，将丝状物放入其中一 支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入 4ml 的 试剂。混合均 匀后，将试管置于 中加热 5min，待试管 后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有 DNA 的溶液是否变 。 实例：用鸡血细胞液粗提取 DNA 并鉴定（苏教版必修 2） 步骤 操作 图示 1、提取鸡 将制备好的鸡血细胞液（已在课前配好）5~10mL，注入到 血细胞的细 50ml 烧杯中。向烧杯中加入 20mL，同时用玻璃棒沿一个方 胞核物质 向快速搅拌 5min，然后，用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至 1000mL 的烧杯中，取其滤液。 高中数学、数学课件、数学教案、数学试卷、高中数学试题。 2、溶解细 胞核内的 DNA 3、析出含 DNA 的粘稠 物 4、滤取含 DNA 的粘稠 物 5、将 DNA 的粘稠物再 溶解 6、过滤含 DNA 的氯化 钠溶液 7、提取含 杂质较少的 DNA 将物质的量浓度为 40 mL 加入到滤液中，并作玻璃 棒沿一个方向搅拌 1min，使其混合均匀，这时 DNA 在溶液中呈溶 解状态。 沿烧杯内壁缓缓加入 ，同时用玻璃棒沿一个方向不 停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现。继续加入蒸馏水，溶 液中出现的黏稠