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【精选】人教版高中生物选修1专题5 课题1《DNA的粗提取与鉴定》word导学案-生物知识点总结


专题 5 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定 一、基础知识 (一)提取 DNA 的方法 提取生物大分子的基本思路是选用一定的 或 方法分离具有不同物理或化学性质的生物 大分子。对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在 和 性质方面 的差异,提取 ,去除其他成分。 (1)DNA 的溶解性: (1)DNA 的溶解性: ? DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的 盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。 ? 此外,DNA 不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于 酒精。利用这一原理,可以将 DNA 与蛋 白质进一步的分离。 (2)DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性: o 蛋白酶能水解 ,但是对 DNA 影响。大多数蛋白质不能忍受 60—80 C 的高温,而 DNA 在 ℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但 对 DNA 影响。 (二)DNA 的鉴定 在 条件下,DNA 遇 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的 试剂。 二、实验设计 (一)实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更 大。 (二)破碎细胞,获取含 DNA 的滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用 玻璃棒 ,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜。 例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱中加入一定的 和 ,进行充分的搅拌和研 磨,过滤后收集研磨液。 (三)去除滤液中的杂质 方案一 利用 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中 的不同,通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂 质。 方案二 直接在滤液中加入嫩肉粉,反应 10~15min,嫩肉粉中的 能够分解蛋白质。 方案三 将滤液放在 ℃的恒温水浴箱保温 10~15min,注意 范围 。 (四)DNA 的 析出与鉴定 1、将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积 、 的酒精溶液(体积分数为 ),静置 min,溶液中会出现 ,这就是粗提取的 DNA。用玻璃棒 搅拌,卷起丝状物, 并用滤纸吸取上面的水分。 2、取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml,将丝状物放入其中一 支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入 4ml 的 试剂。混合均 匀后,将试管置于 中加热 5min,待试管 后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 。 实例:用鸡血细胞液粗提取 DNA 并鉴定(苏教版必修 2) 步骤 操作 图示 1、提取鸡 将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好)5~10mL,注入到 血细胞的细 50ml 烧杯中。向烧杯中加入 20mL,同时用玻璃棒沿一个方 胞核物质 向快速搅拌 5min,然后,用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至 1000mL 的烧杯中,取其滤液。 高中数学、数学课件、数学教案、数学试卷、高中数学试题。 2、溶解细 胞核内的 DNA 3、析出含 DNA 的粘稠 物 4、滤取含 DNA 的粘稠 物 5、将 DNA 的粘稠物再 溶解 6、过滤含 DNA 的氯化 钠溶液 7、提取含 杂质较少的 DNA 将物质的量浓度为 40 mL 加入到滤液中,并作玻璃 棒沿一个方向搅拌 1min,使其混合均匀,这时 DNA 在溶液中呈溶 解状态。 沿烧杯内壁缓缓加入 ,同时用玻璃棒沿一个方向不 停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现。继续加入蒸馏水,溶 液中出现的黏稠

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